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2021年5月27日 星期四
薑的栽培基礎
[栽培技術基礎]
1. 1。起源與歷史
（1）起源
生薑是一種辛辣蔬菜，在世界範圍內已廣為人知。它是從中國來到日本的，也被稱為Hajikami，因為它的味道像Sansho。
姜自古以來就在亞洲溫暖的地區種植，但其野性未知，起源也未知。但是，據說該地區有可能作為原產地，因為其原產地很久，而且它在印度和中國的腹地生產優質的產品。
（2）歷史與栽培史
姜到達日本尚不清楚。根據“熱帶農業技術叢書”（農林水產省），在Tenpei Houji 2（758）和“ Enki-Shiki”（927）的Shokurain文件中可以看到Ikukan的字符。腳趾和越前等國名被稱為著名的產區。另外，在“ Wanasho”（931）中，中國劍被稱為“ Kurenohajikami”，但據說這是最古老的記錄。但是，生薑到達日本的時間似乎早於此，據說在中國的《魏志》（3世紀）中有記載，日本有生薑，但並未使用。日本干沙丁魚的生產始於約300年前，其出口始於1890年左右，據說生產地區是腳趾和三河地區。
除了中國（其統計數據未知）外，近年來世界生薑的主要產地是印度，斐濟，湯加和非洲的烏干達。乾薑的主要出口國是印度，尼日利亞，牙買加等，據說大量進口國是英國，南也門，美國，阿拉伯，新加坡，馬來西亞等。
（3）使用/使用
生薑作為辛辣蔬菜極為重要，並且在全世界範圍內廣泛用於食品和製藥工業。
生薑的分類根據莖的形狀和大小大致分為三類，小生薑，中生薑和大生薑，如表1所示。然而，由於莖的生長的不同，取決於生產區域和栽培條件，存在一些差異。它被分類為中姜。
生薑的主要用途是用於生食，醃製，藥用和工業用途。莖中含有80.8％的水，2.3％的蛋白質，1.0％的脂肪，12.3％的碳水化合物，2.4％的纖維和1.2％的灰分，無機養分含量如表2所示。生食主要用作生薑和葉姜，醃製的薑被醃製並用作各種醃菜的原料。另外，乾薑被廣泛用於食用，醫藥和工業用途。其獨特的香氣和辣味可增加食慾和中毒。
2。性質和生長的特徵
（1）形態特徵
生薑是多年生草本植物，地下有一種結塊，呈黃白色，帶有辛辣的味道和氣味。如圖1所示，莖中有莖桿，細根和蘿蔔。隨著莖的生長，莖的碎片會一個接一個地分支並擴大。
直立的莖從塊狀塊中出來，並包裹在葉子和葉鞘中。莖高40-80厘米，葉子兩排，每對8-12對。花序直接起源於莖，並具有高度為15至20厘米，長度為5至8厘米，寬度為1.5至2.5厘米的圓柱形花刺。種子又小又黑。在熱帶地區，它很少開花，很少產生果實。
如圖2所示，莖塊和莖的大小和重量根據諸如大姜，中薑和小薑的品種而不同。大薑的莖重量為800-1,000克，中薑的重量為500-800克，小薑的重量為300-500克，形成莖的小莖的尺寸有所不同，但劃分順序並沒有那麼大。沒有發現差異。剛開始分裂的小莖的大小稍小，但是早分裂和擴大的莖要好於次莖。
（2）成長進度
由於生薑是多年生草本植物，如果滿足適當的生長條件，它將可以生長很多年。但是，在日本，它的生長與一年生草本植物相同，因為它在冬天在低溫下死亡。
生薑的生長因土壤條件，氣候條件和品種而異，但基本生長特徵如圖3所示。
生薑每小莖有兩個芽。對於種子生薑，請使用種滿了種子且無害蟲的種子生薑。總是從種植的種子薑中發芽一到兩個芽，而不是所有芽都發芽。芽長3-5厘米時，會形成細根。
當新芽生長並到達第5葉階段時，新芽與新芽分離，根部發育活躍。此外，從該芽到第5葉期，下一芽出芽，新芽又一層出芽，團塊莖的增大/生長和根系的發育也活躍。
秸稈分割的順序是規則的，如圖4所示。生長初期的分裂是有序的，但是莖的擴大和葉子的生長已經相當快了。如果滿足氣候和營養條件，它將無限期增長，並會促進莖稈的擴大。
（3）影響產量和質量的條件
（1）種薑的大小，生長和產量
在早期，生薑特別受種子薑的生長影響。隨著根系的發育改善和根系活力的增強，生長的動力從種子薑轉移到根系。
表4顯示了種子生薑的重量與生薑的生長和產量之間的關係。在大薑的近江市，50g組的莖數少一些，生長也差一些，但一般情況下生長似乎沒有太大差異，但100g組似乎適合產量。即使在中等口味的生薑中，100g也被認為是合適的，因為它與Omi的趨勢幾乎相同。另外，種子生薑越大，細菌的數量越多，這是不合適的，因為這會導致新團塊的數量增加，並導致團塊的質量下降。由於這些原因，種子薑不宜太小或太大，似乎小薑的內外約50 g，大中薑的內外約100 g是合適的。
另一方面，使用大姜近江（Omi），通過改變表5所示的位置來檢查其收集種子薑的能力。
當使用主莖時，新薑的生長最好，並且在植物高度，莖數，地上重量和新姜重量方面均表現出色。在初級，次級和第三級莖中，初級莖的生長和產量最差。早發芽並似乎飽滿的小梗不一定像生薑一樣具有很高的能力，而新生薑的生長似乎與組成該梗的小梗的大小密切相關。
（2）生薑與生薑的營養關係
種植了約100克種子薑，在新姜發芽後，將被認為是新姜營養來源的種子薑去除了，並研究了新薑的生長和莖的增大（表6）。種子生薑作為營養源的作用似乎在發芽後約2個月，在去除生薑的第1個月中，莖的數量顯著減少，新生薑的重量也略有減少。從此以後，根的發育將得到改善，並且根將具有為生長提供營養水的能力。此時，種子生薑的表觀損耗率極低，外觀正常。這被認為是與Satoimo和Yamatoimo完全不同的特徵。
（3）品種，栽培和產量/品質
生薑的質量和產量受品種/品系，種植面積和種植條件的影響很大。表7顯示了不同品種和品系的生薑的生長與產量之間的關係，這是田間栽培的結果，而在室內栽培中，生薑的生長進一步增加，產量也顯著增加。圖5顯示了新姜在管房中的生長和開闊田地的種植情況，儘管它隨品種的不同而有所差異，但可以看出，在開闊地和管房中，莖稈的擴大存在很大差異。
另外，關於莖的質量，外觀和內容成分是問題，但是當前，莖的光選擇是最重要的。接下來是辣味，香氣，纖維等
在相同的條件下，確保薑的產量和質量。換句話說，在有利的生長環境條件下種植會導致高質量薑的高產量。
（4）種植方式的差異
可以說，日本生薑的產地在關東以西，這里土壤和氣候條件相對較為發達。
栽培類型包括根姜栽培，葉姜栽培和室內栽培，如圖6所示。根姜通常在4月下旬至5月初種植，沒有後期霜凍的風險，而根姜則在10月至11月收穫，沒有初期霜凍的風險。葉姜栽培包括使用溫床，房屋，木室等使儲存在儲藏室等中的種子薑發芽，並在發芽後50至60天收穫柔軟的可食用生葉薑和軟化的薑。它是一種集約型作物，可耕種5至8次。房屋栽培通常會種植大型生薑，其低溫可擴展性相對較小。既有加熱栽培也有非加熱栽培，但都在考慮在合適的條件下種植柔軟，少辛辣的生薑供原料食用，也可用於生產豐富的種子生薑。 ..
3. 3。產地條件和適宜條件
日本的生薑產區在千葉，茨城縣，長崎，高知，Sa玉等。儘管作物的類型和品種因產地而異，但為了保持生薑的種植面積，基本考慮以下條件。
（1）肥沃的耕地
生薑是一種原本不喜歡連作的蔬菜。主要原因是根莖腐爛和根瘤線蟲的頻繁發生。這是因為它們對生薑造成致命損害，並且難以控制。根莖腐爛和根瘤線蟲的生薑有很大的生長障礙，根本失去了作為生薑的能力。
由於連續不斷地種植肯定會增加損害，因此，每年搬遷耕地是其穩定種植的基礎。因此，通常在高耕地的高地田間種植，可以進行3到5年的輪作，同時避免連續種植。
（2）溫暖的氣候
由於它是一種熱帶蔬菜，因此喜歡高溫高濕，不喜歡乾燥。在日本等冬季氣溫較低的地區，生長的最佳溫度時期有限，因此不可能在關東北部生產大量的生薑。
（3）適宜的濕度和肥沃的土壤
由於生薑的根系較差且根系很少，因此必須使土壤條件肥沃並且具有優異的物理性能。灌溉設施發達的高原火山灰土壤田和島嶼田地比較合適。
（4）風災少的地區
第一個發芽的親本芽對穩定生產很重要。如果它因風而破裂，生長將極差。因此，可以在耕種地點安裝防風柵欄，但適合在風害較小的山區進行耕種。
四。品種及其特徵
品種和品系很多，根據栽培地區的不同，有很多相同的品種也有不同的名稱。在這裡，我們將描述目前大量種植的典型品種的主要特徵。
如表8和表9所示，生薑可以大致分為三種類型：小姜，中薑和大姜。分類的標準是草的形狀，莖的形狀和大小。這些根據栽培方法而有很大不同。
（1）本地物種
它是典型的小姜，栽培面積最大。由於易於栽培，因此用途廣泛，產量高且穩定。莖的外觀為淺綠色，在野外栽培時重300至400 g，並具有很強的辣味和香氣。由於其旺盛的發芽力和生長能力，它被廣泛用作葉薑和軟薑的種子生薑。秋天收穫的大部分生薑都曾經被儲存起來，用於各種種子生薑。用過的老根用於醃製和加工乾薑。通常，進行野外栽培以獲得種子薑，並且對葉薑和軟化姜進行野外，隧道和室內栽培。
（2）散書
它是一種小姜，也被稱為黃薑，因為它的肉質偏黃，並且是僅次於本地物種的最大種植區。根據股票紅色的差異將其分為三行紅和三行白兩行，但特性幾乎相同。生長稍遜於本地物種，但莖的擴增相當好，辣味也不強，適合於生食。
莖淺黃色，重200-300克。所收穫的莖以與本地物種相同的方式臨時存儲，並用作葉薑和軟薑的種子生薑。將其製成葉姜或變軟的志賀葉時，莖的膨大性好且品質優良，但由於發芽的次數少於本地物種的發芽次數，因此產量略低。姜種子的生產在露天場地進行。易受根莖腐爛，Awanomeiga，Nekobu線蟲等侵害。
（3）金時
它是一種小姜，易於種植且產量高，除了植物和樹葉為深紅色以外，與本地物種非常相似。莖是帶褐色的，枝條和菌株特別明亮，帶粉紅色和特徵。
莖重300-400g，香氣濃郁。大量莖的芽萌發力很強，並且生長非常旺盛。最初，它容易在莖和塊上產生紅色，因此特別適合於高溫栽培的軟栽培，而其他品種沒有的獨特紅色則可以提高品質。當用作葉姜時，夏季在植物中進行高溫適度的深紅色栽培是合適的。野外栽培是獲得根薑的常見方法。收穫的生薑被暫時保存。
（4）博shu
它是中等大小的生薑，也有中等粗大和駱駝的名稱。與本地物種和黃金相比，它稍易受低溫影響。它生長相當旺盛，株高高，葉子大。莖的數量和大薑一樣少，但莖又粗又結實。
莖淺黃色，重在500g至800g之間，顯示出腫脹和膨大的趨勢，更像小姜。小莖幾乎是小薑的兩倍，但小於大姜。大部分收穫的生薑沒有儲存，而是用於醃製等加工。有許多露天耕地和房屋未加熱的耕種。特別是，Awanomeiga與大薑一樣容易被攝食。根莖腐爛和Nekobu線蟲也發生。
（5）近江
在日本栽培的生薑中，葉子和塊都最大，並且是大生薑的代表品種。這是一種晚熟種，株高高，莖粗，葉子大，在關東，四國和九州廣泛種植。
莖非常大，重500至1,000克。在室內栽培中，可以延長生長期，因此它可以是2至4公斤的大莖，並且飽滿並且味道很好。莖的外觀為淺黃色，有光澤和豪華感，辣度適中而柔軟。莖的形狀是矩形，可以與印度區分開來，稍後將對此進行描述。在四國和九州的溫暖地區，大部分種植是在室外進行的，但在關東地區，則進行室內種植以提高優質秸稈的產量。它的缺點是特別容易受到金線菊，風和乾旱的破壞，但對根莖腐爛更耐。
（6）印度
它是一種大姜，主要在四國和九州種植。其特徵與近江種非常相似，除了莖呈扇形。
[實際栽培]
戶外栽培
1. 1。現場準備
生薑是難以連續生長的蔬菜的代表。主要原因是根莖腐爛和毛毛蟲。它們從莖桿傳播，同時從土壤傳播。選擇一個在旋轉時受這些害蟲污染較少的田地。此外，如果可能，對土壤進行消毒。用甲基溴對根莖腐爛和線蟲殺蟲劑（如DD和EDB）對Nekobu線蟲進行土壤消毒。
生薑不選擇土壤質量，但如果可能，請選擇排水良好的田地，例如肥沃的火山灰土壤或近海土壤。另外，由於它容易受到風的損害，因此適合在風少的地方使用，但如果不可避免，請安裝防風網。
2。實際栽培管理
（1）種薑的製備
如圖8中的栽培日曆所示，進行根姜野外栽培。首先，種植無病且飽滿的種子薑。將種子生薑分成40至50克（小生薑）和80至100克（中生薑和大生薑），並在陰涼處乾燥約半天。為防止根莖腐爛，可將其浸泡在400倍的原邊可濕性粉劑中浸泡30至60分鐘以進行滅菌，或用原邊粉進行包衣。種子生薑的標準量為每10a小生薑300公斤，中大生薑600公斤。
（2）原肥
人們認為，生薑可以儲存足夠的養分，以使發芽的嫩芽長到5至6片葉子。另外，生薑的根極差並且具有生根淺的缺點。因此，在施肥時，建議撒大量的堆肥等以改善土壤的物理性質，並使無機成分保持在較低水平。
如表10所示，原始肥料為10至15千克氮，適合以追肥為中心的肥料管理。在施藥時，先挖一個寬度為60厘米，寬度為30厘米，深度為20厘米的種植槽，撒上原始肥料，然後掩埋該槽，同時與土壤充分混合以形成種植床。
（3）種植和除草劑處理
播種的最佳時間是最低土壤溫度達到15°C或更高時，而在關東地區，則是從4月初到5月初。
行與行之間的種植間隔為60 cm，植物之間為30 cm，並挖出深度為10 cm的種植溝。種子薑應以新芽面朝上的方式種植，使其垂直於種植溝，並用3至5厘米的土壤覆蓋。
種植後，姜至少需要30天才能在表面發芽。因此，在此期間，我們經常遭受雜草生長的困擾。在種植種子生薑的同時，非常方便地處理諸如trefanoside之類的除草劑，並且不會被雜草困擾。
（4）追土
在生薑栽培中，追肥是重要的，因為追肥的施用量很小，並且土壤收集工作還用於增強追肥的效果。播種生薑後的第一次追肥在主莖的第5至第6葉期進行，然後每30至40天定期進行一次，直到收穫前的1個月。標準劑量是每10 a氮和鉀各3千克。添加肥料時，肥料始終會被覆蓋，並且會收集土壤，但如果可能的話，最好將肥料撒在過道上並與土壤充分混合，以使土壤聚集在生薑的根部，因為它不會損壞新生薑的根。
（5）灌溉
由於生薑根部較淺且較差，並且由於其最初偏愛潮濕環境，因此對灌溉有很大影響。尤其是灌溉效果好，因為它容易受到干旱的破壞，直到形成3-5瓶的基本物理強度為止。灌溉量取決於生長情況，但對於火山灰土壤，張力計讀數適合在pF2.0左右。為了保持土壤水分，每四天大約需要灌溉20毫米。小心灌溉很重要，尤其是在夏季的干旱季節，但是隨著灌溉量的增加，植物基部的土壤變硬，土壤的物理特性變差，因此覆蓋良好的秸稈和透氣性應該一起使用。
（6）收割時間及收割方法的判斷
當生薑在13°C或更低的低溫下放置一定時間或遭受霜凍時，芽和莖被霜凍損壞，導致它們在儲存過程中腐爛並死亡。因此，當固定種子薑時，至少在霜凍或低溫之前收穫。在關東地區，最佳時間是10月中旬左右。對於一般處理，大約11月初時，地面的樹葉開始變黃並由於輕霜和低溫而死亡。
為了進行收割工作，用手將砧木拔出，將莖桿附接到莖上2到3 cm，然後將切下的根原樣保留。收集後立即運輸時，將莖部分切短並去除根部部分，但是一旦作為根姜存放，請小心處理，以免損壞莖幹。每10 a薑的產量為3,000公斤，小姜為4,000至5,000公斤。
（7）害蟲防治
如上所述，根莖腐爛和對Nekobu線蟲的危害是生薑的主要問題。首先，應注意不要選擇未附著這些害蟲的種子生薑，而應使用經鄰位殺蟲劑消毒的根生薑。由於耕地感染很多，因此，請使用已耕種3至5年並已被DD等用Nekobu線蟲滅絕的田地。
萌發時，以nekirimushi和namekuji為食會損壞新芽。在發芽期間，前者噴有諸如Nekiriton之類的引誘劑，而後者則噴有諸如Namekir之類的引誘劑。根莖腐爛和Awanomeiga發生在7月至8月的高溫時期。對於根莖腐爛，應儘早去除患病菌株，並在發生部位噴灑鄰苯二甲酸酯粉末以防止其擴散。Awanomeiga發生至10月初，除非在幼蟲之間消滅，否則很難控制，因此有必要每7至10天噴灑一次農藥。特別是中，大型生薑被Awanomeiga食用，因此在控制它們時必須小心。在9月至10月的冷雨期間，樹葉上會發生白斑病，因此，請使用Daisen可濕性粉劑或Daconil可濕性粉劑進行防治。
（8）生薑的貯藏
大部分收穫的生薑都被臨時儲存起來。對於存儲位置，將使用井眼和在排水良好的火山灰土地區中的存儲。簡而言之，適合於土壤溫度為13〜15℃，濕度為70〜80％的地方連續地進行。
將地下洞挖成一個深度為1.2至2.0 m，寬度為50至60 cm的矩形，如圖9所示，埋入土壤和生薑，同時交替堆積約30 cm的厚度。地下洞內的溫度變化如圖10所示，並且可以保持到第二年5月。如果不合適的話，這種方法會受到外界溫度變化的影響，並且根姜會因低溫而死亡，或者相反，地下孔會變得太深，變熱發芽，無法用作生薑。也有不穩定因素。但是，如果您熟練並學習了訣竅，那麼問題就很少了，並且可以將其存儲在收割場的一角，這是一個優點。
如果使用存儲，很容易人為地保持適合根薑的環境條件，因此全年穩定存儲很容易。收穫生薑後，為了提高貯藏的利用率，建議在貯藏前暫時在土壤中躺20至30天，以除去殘留的莖和根。可以將其原樣放入容器中或堆放在冰箱中，但在長期存放時，適合在莖之間裝滿紅色土壤，以防止質量和磨損變差。
從收穫季節到次年5月，儲存溫度應控制在15°C，從5月至12月，儲存溫度應控制在13至15°C。Namekuji和Tobimushi很容易在冰箱中繁殖，並且會吃根姜，因此需要噴灑農藥。
https://gfcl.com.tw/2gfcl/index.php?route=product/product&product_id=750
利用顯微鏡觀察微生物
http://cte.hk.edu.tw/~cte/teacher/7/7-2.htm
第一節 前言
微生物大多無法直接用肉眼看見，顯微鏡可以將其放大，以利於觀察，因此顯微鏡鏡檢是研究微生物主要方法之一。顯微鏡有兩種，分別是光學顯微鏡（light microscopes）和電子顯微鏡（electron microscopes），光學顯微鏡可利用光線及透鏡將欲觀察的物體放大，而電子顯微鏡則利用電子放大物體。光學顯微鏡大多只能放大1000倍，而電子顯微鏡可放大至10萬倍或更高。
第二節 光學原理
解像力（resolving power）為可見物體的最小直徑（見○圖2-1○），也相當於波長∕光口角（numerical aperture；NA）；光口角等於n‧sinθ，其中θ為光透至物鏡形成的開口角度的一半；n為蓋玻片與物鏡前透鏡間介質的折射係數（refractive index），一般乾式透鏡的n=1，因為空氣的折射係數為1，所以NA一定小於1；若使用油鏡，n=1.56，NA值則在1.2~1.4間（見○圖2-2○）。一般光學顯微鏡之解像力需達0.17μm,否則大部份的細菌無法檢出，假如顯微鏡的解像力為0.2μm，直徑小於0.2μm的細菌就無法觀察得到。
第三節 光學顯微鏡
光學顯微鏡可由一片或多片凸透鏡，當光線透過鏡片時，產生放大的效果。簡單顯微鏡（simple microscopes）是由一片凸透鏡所組成，一般我們所使用的放大鏡便是，一般簡單顯微鏡只能放大到10倍左右，倍數過高會因解像力不足，而使影像模糊失真。複式顯微鏡（compound microscopes）（見○圖2-3○）則是由2~3片放大透鏡組成，通常只有兩片放大透鏡，分別稱為接物鏡（objective lens）和接目鏡（eyepiece lens），接目鏡乘以接物鏡的倍數，即得顯微鏡之總放大倍數。例如，物鏡是40×，目鏡是10×，則總放大倍數是400×。
若要仔細觀察細菌，需採用100×物鏡，加上10×目鏡，總放大倍數為1000×，為了達到良好的聚光效果，物鏡必需浸於一滴無色的油中，因此100×又稱為油鏡（oil immersion lens）。使用時，先將一滴純度高透明的礦物油，滴在欲觀察檢體的蓋玻片上，再將物鏡慢慢地浸入油中，微調焦距。
顯微鏡依特性分為﹕
1、 明視野顯微鏡（light field microscopes）﹕利用自然光或電燈光源，依光學原理，使檢體本身呈暗的狀態，背景為明亮的狀態。
2、 暗視野顯微鏡（dark field microscopes）﹕加裝集光器（condenser），引導光源進行的路徑，使檢體呈明亮，背景則呈暗影（見○圖2-4○）。
3、 紫外線顯微鏡（ultraviolet microscopes）﹕使用紫外線為光源，波長較短，所以有助於解像力，但是紫外線無法目視，需要將影像顯示在螢幕上。
4、 螢光顯微鏡（fluorescence microscopes）﹕有些處理過的檢體可以吸收紫外線，放出較長波長的可見光，此現象稱為螢光反應（fluorescence），這種使檢體產生螢光的螢光染色劑，可以用在抗體免疫技術之應用（見○圖2-5○）。
5、 位相差顯微鏡（phase contrast microscopes）﹕主要設置為一位相差物鏡（phase contrast objective lens）及聚光鏡（見○圖2-6○），利用菌體各部位密度的差異，產生光線折射的不同，使細胞不同部位的對比更強烈，藉而分辨細胞內不同的構造。
第四節 光學顯微鏡檢體製備和染色
微生物不論染色與否，均可在顯微鏡下觀察，未染色的觀察方法有二﹕
1、 濕抹片檢查（wet mount）﹕先加一滴水或生理食鹽水（saline）於載玻片上，再將檢體塗抹在水中，覆蓋一片蓋玻片，然後置於顯微鏡下觀察。濕抹片檢查法可以觀察到細菌的大小和形狀、部份的微細結構和微生物的運動性。濕抹片檢查可以使用明視野鏡檢，也可以使用暗視野鏡檢。
2、 懸滴法（hanging drop method）（見○圖2-7○）﹕先將一滴檢體滴於蓋玻片上，然後翻過來蓋在中央有凹槽的載玻片上，使水滴自由懸浮於蓋玻片下，允許其中微生物自由運動，此懸滴法主要用途是觀察微生物的鞭毛運動情形。
此外，細菌表面或內部有某些構造可與染劑發生離子交換，當染劑中帶顏色的染劑離子與細菌結構的離子產生交換，便可以將細菌的特殊結構染色。染色的目的有（1）鑑定不同菌體之形態；（2）鑑別不同菌體之結構；（3）提高顯微鏡的解像能力。
染劑的種類依帶電荷分為﹕（1）酸性染劑 – 用於鹼性結構的染色，例如細胞質之染色；（2）鹼性染劑 – 用於酸性結構的染色，例如細胞核和細胞粒；（3）中性染劑– 缺乏可解離的化學基，所以多數可與脂肪結合。
另外所謂媒染劑（mordant），意指可與染劑形成不溶性物質者，常先染劑用於檢體，以增加染劑對檢體之親和力，常使用的例子是鞭毛的染色。
染色的方法有三﹕
1、 簡單染色法（simple staining）﹕指溶液只使用一種染劑的染色法，常用的是鹼性染劑。
2、 鑑別染色法（differential staining）﹕鑑識菌體或菌體中特殊部位，而使用一種以上染劑的染色方法。常用的方法有六﹕
1. 革蘭氏染色法（Gram staining）﹕於1884年由丹麥微生物學家Hans Christian Gram所發明。此鑑別染色法可以將細菌分成革蘭氏陽性菌（G+）及革蘭氏陰性菌（G-），但是高等動物細胞則無法被革蘭氏染色劑染色。革蘭氏染色有四個步驟﹕首先在已固定的抹片上，滴加結晶紫（crystal violet），經過一分鐘讓細菌吸收染劑，然後用水沖掉，加入碘化鉀溶液，碘與結晶紫和細菌的細胞壁反應一分鐘後，用水洗掉，再加入脫色劑，通常是95﹪酒精或丙酮。無法被脫色的細菌，稱為革蘭氏陽性菌，保留染劑的原因與細菌的細胞壁構造有關；而能被脫色的細菌，稱為革蘭氏陰性菌，需要使用對比染色劑番紅（safranin）將被脫色的革蘭氏陰性菌染成粉紅色。
2. 抗酸染色法（acid-fasting staining）﹕又稱Ziehl-Neelsen staining，有些菌體外包脂肪質或蠟質物質，當用強脫色劑處理後，仍會保留染色的顏色，這些細菌就叫抗酸菌。染色後的抗酸菌呈粉紅色或紅色，非抗酸菌則為藍色。
3. 鞭毛染色法（flagella staining）﹕鞭毛形體大小接近光學顯微鏡解像力的限制，所以染色前需先使用染媒，使鞭毛有化學沉澱生成，增大鞭毛，然後用鹼性洋紅染色，染色後鞭毛呈紅色，而細胞為藍色。
4. 莢膜染色法（capsule staining）﹕莢膜為黏質外層，成份為多醣體，較難染色，可以使用印度墨水（India ink）行陰性染色（見○圖2-8○）。
5. 孢子染色法（spore staining）﹕使用孔雀綠（malachite green）和番紅（safranine O）染色，孢子染成綠色，而菌體為紅色。
6. 細胞壁染色法（cell wall staining）﹕細胞壁厚，染色不易，但可以先用染媒劑處理，使細胞壁呈正電荷，再用酸性染劑處理。
3、 陰性染色法（negative staining）﹕菌體本身不染色，而是將背景部份染色。例如使用印度墨水或黑色素（nigrosin）染色，以油鏡或暗視野鏡檢。
第五節 電子顯微鏡
電子顯微鏡是利用電磁波，提高放大的倍率及加強解像力。1932年Bruche及Johannson合作製造第一架電子顯微鏡，現代電子顯微鏡的構造見○圖2-9○。電子顯微鏡的顯微鏡的解像力可達3Å，電子光束擴大檢體的影像，結聚至鏡筒末端之螢幕上，可以在投影的終端機上檢視，其投射的路徑和光學顯微鏡的差異可參考○圖2-10○。
電子顯微鏡的原理如下﹕陰電極釋放出5萬伏特的加速電子光束，由磁性收集器（magnetic condenser）整理，使電子光束形成一直線，均勻通過檢體，由於檢體密度不同，電子光束被檢體吸收的程度也會有異，通過檢體的電子光束強度於是產生相對的差異，這些通過的電子光束再經過磁性物鏡的牽引，產生偏離，使得電子束的角度放大，因而得到放大效果。但是電子光束無法目視，需要以螢幕顯像，螢幕影像的亮度取決於撞擊電子光束的強度。
第六節 電子顯微鏡檢體製備
電子顯微鏡的檢體需在真空下鏡檢，通常有3種製備的方法﹕（1）直接鏡檢法；（2）複式印製法（replica method）；（3）投影法（shadow-casting method）。電子顯微鏡雖然可以將檢體的影像放大，但是必需在真空中進行，因此無法檢視活菌體，此外，強烈電子光束照射，產生高熱，容易使檢體變形，最後，電子光束的穿透力低，因此觀察細胞內部構造時，需使用薄切片才可。
第七節 結語
主要幾種顯微鏡的比較如下﹕
種類 | 最大放大倍數 | 檢體處理 | 應用對象 |
1、明視野顯微鏡 | 1,000~2,000 | 染或未染色 | 觀察未染色的細菌、黴菌、酵母菌、藻類及原生動物 |
2、暗視野顯微鏡 | 1,000~2,000 | 通常未加染色 | 觀察活菌體特殊部位，如Spirochetes |
3、螢光顯微鏡 | 1,000~2,000 | 明亮具螢光反應 | 由螢光反應而有助於臨床診斷技術 |
4、位相差顯微鏡 | 1,000~2,000 | 不同的暗度 | 檢視較大活菌體之細胞構造，如酵母菌、藻類、原生動物及一些細菌 |
5、電子顯微鏡 | 200,000~40,000 | 於螢幕上顯示檢體 | 檢視很小的菌體，如病毒及菌體之超微小構造。 |
第八節 微生物相關資訊
參考書目﹕
1.Tortora G.J., Funke B.R. & Case C.L. 1998, Microbiology – An Introduction, 6thedition. Publishing Co., Benjamin/Cummings Publishing Company, Menlo Park, CA
2.王進琦編著，2000，基礎微生物學，藝軒圖書出版社。
3.蔡文城編著，2000，微生物學，藝軒圖書出版社。
微生物相關網站﹕
URL:http://www.microscopy-online.com/
provides the commercial and non-commercial microscopy communities with a forum for information exchange.
○History of the Light Microscope○
URL: http://www.utmem.edu/~thjones/hist/hist_mic.htm
covers the early history of the microscope, starting with use of a simple lens in ancient times, to the first compound microscope, up to the microscopes of the 19th century.
○Argonne National Laboratory - Microscopy and Microanalysis○
URL: http://www.amc.anl.gov/
includes information about the Advanced Analytical Electron Microscope and Tele-Presence Microscopy Projects.
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